一、GB5009.202—2016食用油中极性组分(PC)的测定

1 范围

本标准规定了食用动植物油脂中极性组分(PC)的测定方法。

本标准适用于各类食用动植物油脂中的极性组分(PC)含量的测定。

2 第一法 制备型快速柱层析法原理

通过制备型快速柱层析技术的分离，油脂试样被分为非极性组分和极性组分两部分，其中非极性组分首先被洗脱并蒸干溶剂后称重，油脂试样扣除非极性组分的剩余部分即为极性组分。

二、实验部分

2.1 食用油分离

精密称取1 g食用油，用5 mL石油醚将食用油样品充分溶解为澄清液，用10 mL注射器吸取全部样品液体，快速注射进正相硅胶分离柱的入口处。按表1参数进行食用油组分的分离。

2.2 实验参数设置

2.3 分离结果

食用油中非极性组分与极性组分在三泰科技（常州）标准型快速分离柱上分离的色谱图见下图1：

图1 食用油在三泰科技SepaFlash标准型快速分离柱上分离的色谱图

相比较GB5009.202—2016第二法柱层析法，第一法制备型快速柱层析法拥有更为高效、准确、一致性稳定的特点，采用三泰科技推出的SepaBean machine系列快速制备液相色谱系统搭配SepaFlash系列商业化预装符合国际标准的稳定性高的分离柱，具有自动稳定液体输送配比、自动化简易操作、在线紫外监测系统、自动收集系统、实验结果重复性好等显著优势。

以非极性组分洗脱液为流动相对制备型快速柱层析系统的流动相管路进行润洗，排尽流动相管路内的气体。取1支食用油极性组分快速分离制备色谱柱，连接入制备型快速柱层析系统的流动相管路，以非极性组分洗脱液为流动相，25 mL/min的流速冲洗快速分离制备色谱柱10 min，使快速分离制备色谱柱完全被溶剂所浸润,弃去冲洗液。

5.3 非极性组分的分离

取1只干净的10 mL玻璃烧杯，准确称取1 g(精确到0.001 g)的油脂样品(m )(5.1)，然后用5 mL的石油醚将油脂样品充分溶解，成为上样液。将快速分离制备色谱柱的上端与流动相管路断开，用1支干净的10 mL一次性塑料注射器吸取全部上样液后，快速注射入快速分离制备色谱柱的上端入口处，再用3 mL的石油醚洗涤10 mL玻璃烧杯内残留的上样液，洗涤液也用同一支10 mL一次性塑料注射器全部吸取后，注射入快速分离制备色谱柱的上端入口处，再将快速分离制备色谱柱的上端与流动相管路连接，按以下参数进行非极性组分的分离：

a) 流动相：非极性组分洗脱液；

b) 流动相流速：25 mL/min；

c) 部分收集器：以1000 mL小口玻璃收集瓶为收集容器，从洗脱开始以全收集模式进行收集；

d) 紫外检测器监测波长：200 nm；

e) 启用实时监测系统，获得洗脱色谱图；

f) 溶剂温度控制系统温度：10 ℃；

g) 洗脱时间：11 min。

进行制备型快速柱层析操作时，实验的环境温度应不高于25 ℃。

5.4 非极性组分的收集、浓缩和定量

取1个干净的500 mL烧瓶放入103 ℃±2 ℃的恒温干燥箱内，烘1 h左右，然后取出立即放入玻璃干燥器内冷却至室温，然后称重(m0，精确至0.001 g)。根据5.3分离操作所获得的实时监测数据，非极性组分最大的色谱峰的结束时间点应控制在4.5 min~6.8 min区间内(如附录A 所示)，此时将洗脱时间区间为0 min~11 min内所有收集的洗脱液(1000 mL小口玻璃收集瓶内)倒入此500 mL圆底烧瓶内。

然后将此装有收集洗脱液的500 mL烧瓶置于水浴温度为60 ℃的旋转蒸发仪内，常压条件下，将其中的溶剂大部分蒸发，然后再在负压条件下，将剩余少量溶剂旋转蒸发至近干，取出该烧瓶并擦干烧瓶外壁的水。然后将此500 mL 烧瓶放入40 ℃的真空恒温干燥箱，在0.1 MPa的负压条件下，烘20 min~30 min，结束后放入玻璃干燥器内冷却至室温，然后称重(m1，精确至0.001 g)，(m1-m0)即为非极性组分的质量。

若需收集极性组分，可按照附录B中的B.1进行。获得的非极性组分和极性组分的分离效果应按照附录B中的B.2进行验证。

6 分析结果的表述

油脂试样中极性组分的含量按式(1)计算：

X =100% - (m1 -m0)/m ×100% …………………………(1)

式中：

X ———油脂样品的极性组分含量，%；

m0 ———空白500 mL烧瓶的质量，单位为克(g)；

m1 ———蒸干溶剂后，装有非极性组分的500 mL烧瓶的总质量，单位为克(g)；

m ———油脂样品称样量，单位为克(g)。

计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，保留至小数点后1位。

7 精密度

当极性组分含量≤20%时，在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的15%；当极性组分含量>20%时，在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。

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