蒸发光散射检测器(Evaporative Light-scattering Detector)是通用型检测器,可以检测挥发性低于流动相的化合物,消除了HPLC的常见弱点,特别是没有紫外吸收的有机物质,如人参皂苷、黄芪甲苷等。本应用案例中,由于样品结构中没有足够的发色基团,所以用UV检测器监测不到有效组分。三泰科技有限公司将SepaBeanTM machine T与低温型蒸发光散射检测器联合使用,成功解决了中压制备中样品没有紫外吸收问题。
样品来自于某CRO公司的脂质体,没有紫外吸收点板需用磷钼酸显色,粗品中组分较多,杂质主要集中在目标峰前面,从谱图中可以看出样品在UV检测器下没有紫外吸收,但是在ELSD中吸收值很高,且主要组分能达到基线分离,不需要全部点板确认组分位置,有效的缩短了制备时间。
图一:脂质体样品中压制备谱图
案例二:较UV检测器,ELSD检测器没有溶剂背景吸收
图二:纯度约20%的粗品中压制备谱图
在HPLC及中高压制备中,紫外检测器因其稳定性和高灵敏度应用更广泛,但是它所能检测到的是带有紫外吸收的发色团,这一特性限制了紫外检测器所应用的样品和溶剂选择范围。示差检测器也是一种通用性检测器,但因其对工作环境要求较高,恒温,恒流速,且不能梯度洗脱,检测灵敏度不高使其没有被广泛应用。ELSD检测器在一定程度上弥补了上述两种检测器的不足,其响应值不依赖于样品的光学性质,对于所有样品的检测都具有相同的响应因子,ELSD检测器在响应信号出峰前溶剂已经被蒸发,所以将溶剂的影响降至最低。
三泰科技出品的SepaFlashTM FP LT-ELSD的详细参数参见表2,订货信息参见表3。