工作原理

紫外检测器，是基于溶质分子吸收紫外光的原理设计的检测器。通过对特定波长下流通池内组分的吸光度转化为相应电信号，电信号在短时间内形成峰形，用以显示某个组分。而DAD检测器是紫外检测器的一个分支，主要特点是用光电二极管阵列的同时接受来自流通池的全光谱透过光，与普通紫外检测器不同的是样品池位于光栅的后方，同时将检测器设置成一排二极管的阵列，这样透过样品池之后的光经过光栅分解成多束光，每个波长的光都会有一个对应的二极管检测其强度，从而可以同时获得多波长下信息。

 图1. 二极管阵列检测器检测原理示意图

全波段扫描是二极管阵列检测器具有的功能，它可以在同一时间采集多个波长的信号，这些波长在该时间点下可以形成该时间点处样品池内物质的紫外扫描图谱，这个紫外图谱就是全波段扫描。同一个物质对不同波长光的吸收情况不同，吸光度最大处对应的波长即为最大吸收波长，实验过程中一般选择对样品有最大吸收的波长进行，以提高最大灵敏度和抗干扰能力，因此确定最大吸收波长对制备纯化至关重要。

具体操作

全波段扫描

在SepaBean machine APP里选择正相分离或反相分离模式，先设置样品信息和HPLC信息。进入分离设置界面设置相关信息，点击全波段设置按钮（如图2所示），后面谱图就会出现全波段采集图谱，用蓝色的线表现出来。

全波段收集

1. 在收集方式里面选择全波段收集，选择该模式时，全波段检测自动开启，根据检测器波长范围填写波长扫描范围、波长间隔、收集阈值，吸收值超过设定的阈值时收集；低于此值，则排废液。在使用此收集模式时，应注意溶剂背景吸收问题，尽量选择在波长扫描范围内没有背景吸收的溶剂。

2. 设置全波段收集的参数：波长扫描范围、波长间隔、收集阈值

简单的纯度分析

特征吸收光谱的差异：同一样品由于进样量的区别，在整体吸收强弱上会有区别，但是具体特征不会变化。如已知该组分在某一波长下无吸收，但是全波段数据却显示有特征吸收，则证明该物质不纯，如图6中组分已知在600 nm下无吸收，但是检测结果却有吸收，如图中蓝色椭圆标记的位置，样品在600 nm处有明显吸收，则证明其纯度不高。

 图6 历史记录中收集组分初步纯度判断界面

在样品检测波长未知的情况下，全波段扫描及全波段收集模式的功能至关重要。SepaBean machine系列快速液相制备色谱系统中采用的全波段扫描模块，在制备过程中，可以随时监测到每个组分的各个波长下得吸光度情况，了解样品的最大吸收波长并根据全波段谱图进行初步纯度判断及简单定性。