大家在制备过程中,有什么让你措手不及或印象深刻的事情,相信大部分实验人员,最怕的莫过于丢失样品组分,特别是对于未知样品或杂质提纯时,在无法确定其最佳吸收波长的情况下,由于设定的紫外吸收值有误,很容易导致样品丢失。三泰科技推出的SepaBean machine全波段功能可以帮助我们避开这个雷区,不仅在制备过程中,实时监测组分的吸光度,还有全波段收集模式来进行馏分收集,制备结束后还可以在历史记录中查看最佳吸收波长,可谓功能“齐全”。
通过图4样品制备记录中的图谱可以看出,样品分离度很好,但是目标馏分在254 nm下吸收太弱,导致馏分没有被完全接收到,通过SepaBean APP右下角中的DAD实时监测可以看出,目标组分在220 nm左右有最大吸光度,为了防止馏分丢失,我们收集也将采用全波段收集模式。
接下来我们就应用全波段扫描和全波段收集模式来看看样品制备的优势,在上面实验条件的基础上我们将波长设置为254 nm、220 nm、全波段谱图采集,制备谱图如图2所示。
图2.样品在254nm、220nm、全波段扫描下的制备谱图
通过分析图2可以看出,在调整波长的条件后,目标馏分在220 nm和全波段图谱下的吸收值比254 nm下高3倍以上,很利于馏分的回收,保证了样品的回收率。
在样品的波长未知的情况下,全波段扫描及全波段收集模式的功能至关重要。SepaBean machine系列快速液相制备色谱系统中采用的全波段扫描模块,在制备过程中,可以随时监测到每个组分的最大吸光度,当你所设定的波长参数不是最大吸收波长,及时修改波长参数,或者在历史记录里面查看目标组分的最大吸收波长,下次制备就可以选择合适的波长进行制备,避免样品丢失。收集模式也可设定为全波段收集,即设置组分所需要的波长的扫描范围及收集阈值,则样品在设置好的波长范围内有吸收,且达到设置的阈值上限系统就会自动收集。